拿到雞卵泡顆粒細(xì)胞應(yīng)執(zhí)行以下操作

　　雞卵泡顆粒細(xì)胞是卵巢的主要功能細(xì)胞，它們的增殖和分化直接影響卵巢功能活動(dòng)，如卵泡的生長(zhǎng)起始、發(fā)育、排卵、黃體形成和類固醇激素的分泌，細(xì)胞呈圓形或橢圓形。細(xì)胞總數(shù)約5×105個(gè)/瓶，細(xì)胞純度高達(dá)80%以上，不含HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

　　從雞卵泡組織中分離出雞卵泡顆粒細(xì)胞；成熟卵泡是卵巢的結(jié)構(gòu)成分之一。卵泡腔大，卵丘明顯。卵泡的子宮內(nèi)膜細(xì)胞靠近卵泡的顆粒層，它們之間有基底膜。子宮內(nèi)膜細(xì)胞呈多角形，胞質(zhì)清晰，核圓形。細(xì)胞間可見(jiàn)許多毛細(xì)血管。外膜細(xì)胞位于最外層，多呈梭形，與周圍結(jié)締組織無(wú)明顯界限。卵泡內(nèi)的卵母細(xì)胞周圍有一層菱形或扁平細(xì)胞。當(dāng)卵泡開(kāi)始發(fā)育，卵細(xì)胞生長(zhǎng)時(shí)，周圍的菱形細(xì)胞變成立方體，由單層長(zhǎng)成多層。由于其細(xì)胞質(zhì)中有顆粒，故稱為顆粒細(xì)胞。初級(jí)卵泡的顆粒細(xì)胞為單層；次級(jí)濾泡的顆粒細(xì)胞增加至多層；成熟卵泡的顆粒細(xì)胞膨脹并成為單層。顆粒細(xì)胞核大而圓，顏色深。細(xì)胞的自由表面有許多細(xì)長(zhǎng)的突起延伸到輻射區(qū)的凹陷處。

 

　　收到雞卵泡顆粒細(xì)胞后，檢查外包裝是否完整，細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。并執(zhí)行以下操作：

　　1、用1.75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。

　　2、將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中，并在處理前預(yù)熱3-4小時(shí)，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

　　3、預(yù)熱*培養(yǎng)基（包括1%雙抗體）。

　　4、顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，對(duì)不同倍數(shù)（40×、100×、200×各1個(gè)）的細(xì)胞進(jìn)行拍照。

　　5、如果細(xì)胞密度小，無(wú)菌操作，除去培養(yǎng)基。向每瓶中加入5-6ml步驟4中制備的培養(yǎng)基。將其放入37度的培養(yǎng)箱中。當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%以上時(shí)，傳代培養(yǎng)。如果細(xì)胞密度大，達(dá)到80%以上，則進(jìn)行傳代培養(yǎng)。