UMNSAH/DF-1（雞胚成纖維細胞）在生物反應(yīng)器中的大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)優(yōu)化

UMNSAH/DF-1細胞是源自10日齡家雞胚胎的自發(fā)永生化雞胚成纖維細胞株，經(jīng)原代分離及長期傳代培養(yǎng)篩選獲得。該細胞株兼具成纖維細胞的典型特征與永生化細胞的穩(wěn)定增殖能力，在生物醫(yī)學(xué)研究中展現(xiàn)出獨-特優(yōu)勢，尤其適用于病毒學(xué)研究、重組蛋白表達及疫苗生產(chǎn)等領(lǐng)域。

UMNSAH/DF-1雞胚成纖維細胞特性

基礎(chǔ)屬性

種屬：家雞（Gallus gallus domesticus）

細胞形態(tài)：成纖維細胞樣，呈梭形或星形貼壁生長

生長特性：接觸抑制明顯，但永生化特性保障長期傳代穩(wěn)定性

生物安全等級：BSL-1

關(guān)鍵優(yōu)勢

非轉(zhuǎn)化性安全：軟瓊脂集落形成試驗證實無致瘤性（免疫缺陷小鼠模型及半固體培養(yǎng)基中均未觀察到腫瘤形成）

溫度敏感性可控：專為禽類體溫設(shè)計（38-40℃），39℃為最佳培養(yǎng)溫度，避免37℃培養(yǎng)導(dǎo)致的狀態(tài)衰退

高穩(wěn)定性：經(jīng)超過30代傳代驗證，基因型與表型保持高度一致

培養(yǎng)指南

培養(yǎng)體系

基礎(chǔ)培養(yǎng)基：DMEM（PM150210）

血清補充：10% FBS（164210）

抗生素：1%雙抗（PB180120）

氣體環(huán)境：5% CO? + 95%空氣

推薦傳代比例：1:3至1:8（每2-3天）

關(guān)鍵操作要點

溫度控制：

必須使用專用培養(yǎng)箱（38-40℃），溫度波動易誘發(fā)細胞空泡化

收貨后可能出現(xiàn)短暫空泡，穩(wěn)定培養(yǎng)2-3代可恢復(fù)

凍存與復(fù)蘇：

凍存液配方：55%基礎(chǔ)培養(yǎng)基 + 40%FBS + 5%DMSO

液氮長期保存，復(fù)蘇時快速融化并離心去除DMSO

換液頻率：每2-3天更換新鮮培養(yǎng)基，維持營養(yǎng)供應(yīng)

應(yīng)用領(lǐng)域

病毒學(xué)研究：

作為禽類病毒（如禽-流感病毒、馬立克氏病病毒）增殖的優(yōu)選基質(zhì)

支持病毒滴度測定與疫苗株篩選

重組蛋白生產(chǎn)：

高表達效率適用于禽源蛋白（如卵清蛋白、干擾素）的規(guī)模化制備

基因功能研究：

適用于CRISPR/Cas9基因編輯及穩(wěn)定細胞系構(gòu)建

疫苗開發(fā)：

作為重組病毒載體疫苗的生產(chǎn)平臺（如腺病毒載體）

質(zhì)量控制

細胞身份驗證：STR基因分型與種屬特異性PCR確認(rèn)

微生物檢測：無菌、支原體、病毒病原體陰性

活力保證：復(fù)蘇后存活率≥90%，傳代穩(wěn)定性驗證≥10代

來源追溯：ATCC保藏編號CRL-12203，全程可溯源

注意事項

避免37℃培養(yǎng)，建議配置專用培養(yǎng)箱

傳代時消化時間控制在2-3分鐘，避免過度刮取損傷細胞

凍存管標(biāo)注清晰，嚴(yán)格遵循液氮保存規(guī)范

細胞信息

產(chǎn)品編號：UMNSAH/DF-1

保藏機構(gòu)：ATCC（CRL-12203）

推薦配套試劑：

專用培養(yǎng)基套裝（含DMEM+FBS+雙抗）

細胞凍存液（預(yù)混型）

1. UMNSAH/DF-1細胞以其獨-特的溫度適應(yīng)性和非致瘤特性，成為禽類細胞模型中的標(biāo)-桿工具。嚴(yán)格遵循本指南操作，可最大限度發(fā)揮其在科研與工業(yè)應(yīng)用中的價值。